Seminarios científicos en la U.N.Sa.

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IPEEl Instituto de Patología Experimental (IPE), realiza todos los viernes en la U.N.Sa, Seminarios científicos a cargo de becarios  e investigadores vinculados a proyectos que se realizan dentro del Instituto, el próximo viernes 28 de Abril se presentará el trabajo de tesis doctoral de la Lic. Ana Florencia Vega Benedetti,”Papel del gen PLAGL1 en carcinoma hepatocelular”, bajo la dirección del Dr. Luís A. Parada.

El Instituto de Patología Experimental (IPE), quien trabaja como unidad ejecutora del CONICET, realiza todos los viernes en la Facultad de Ciencias de la Salud de la Universidad Nacional de Salta, seminarios científicos vinculados a proyectos que se trabajan dentro del instituto. Los mismos, tratan sobre avances y resultados de los proyectos que se realizan dentro del instituto. Luego de la exposición se genera una cordial interacción científica con el público presente.

El gen PLAGL1 codifica para una proteína homónima que regula el arresto del ciclo celular y la apoptosis, por lo que es considerado un gen supresor de tumores. Esta regulación ocurre a través de vías de señalización que incluyen p53 y PPARγ, los cuales inducen p21, que es un importante regulador del ciclo celular. Se ha demostrado que las pérdidas genómicas de la región cromosómica donde mapea PLAGL1 (6q24) en ocasiones están asociadas con metilación anormal del alelo remanente y que esto conduce a una disminución de la expresión de la proteína. La hipótesis de trabajo fue que si bien las alteraciones conducentes a desbalances genómicos tienen un rol en el desarrollo tumoral, otros cambios, tales como los epigenéticos podrían influenciar en la expresión de PLAGL1 y por consiguiente en el papel de la proteína en el desarrollo del carcinoma hepatocelular. Para estudiar la relación entre PLAGL1 y hepatoma, en primer lugar se caracterizaron desde el punto de vista citogenético cuatro líneas tumorales de hígado (PLC/PRF/5, SkHep1, Huh7 y HepG2), utilizadas como modelo experimental in vitro y también diez muestras de tumores frescos mediante array-CGH. Estos ensayos mostraron que pérdidas genómicas de la región donde mapea PLAGL1 son frecuentes en hepatomas. También se investigó el estado de metilación del promotor P1 de PLAGL1 mediante PCR-metil-específica y se determinó un porcentaje de metilación superior al 50% en las cuatro líneas tumorales. A continuación, se determinó el nivel de mARN y proteínas de PLAGL1, mediante RT-qPCR y Western blot respectivamente, conjuntamente con el de p53, PPARγ y p21, durante la proliferación de células de hepatomas. Estos experimentos mostraron en general que la transcripción y expresión de PLAGL1 es menor en células tumorales que en fibroblastos normales usados como control. Además, se encontró que durante proliferación, los fibroblastos sufren una marcada disminución transitoria y posterior aumento gradual de los niveles de mARN y proteína de PLAGL1, p53 y p21 que sugiere una participación conjunta y orquestada en el control del crecimiento normal. Por el contrario, los niveles uniformemente bajos de mARN y de la proteína PLAGL1 obtenidos en los ensayos de proliferación indican que se establece una dinámica diferente en la regulación de la elevada proliferación de las células tumorales e indirectamente sugieren que PLAGL1 juega un papel en hepatocarcinogénesis. Estos resultados motivaron la realización de ensayos de transfección con una construcción genética que contiene la secuencia completa del gen PLAGL1, y se encontró que las transfecciones causaron incremento de la expresión de PLAGL1 y p21. Mediante recuento celular y citometría de flujo se detectó una disminución del número de células totales y del porcentaje de células en G2/M, sin embargo el efecto inhibitorio sobre el crecimiento celular no alcanzó niveles de significancia estadística.
En resumen, los resultados del trabajo de tesis doctoral demuestran que PLAGL1 efectivamente ejerce un papel en la proliferación de células tumorales hepáticas y sugieren que el mecanismo de señalización en el que interviene durante hepatocarcinogénesis es complejo.

Se ruega puntualidad.

Para mas información sobre los seminarios del IPE acceder a: http://ipe.unsa.edu.ar/seminarios

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